Tách chiết nucleic acid là một trong những kỹ thuật quan trọng và phổ biến trong các phòng thí nghiệm sinh học phân tử, di truyền học và sinh vật học. Nó là bước cần thiết để thu thập nucleic acid sạch để phục vụ cho công tác nghiên cứu và xét nghiệm chẩn đoán.
Hiện nay, trên thị trường có nhiều bộ kit tách chiết nucleic acid khá tiện lợi, phù hợp với mỗi loại mô và tế bào khác nhau. Tuy nhiên, mỗi phương pháp tách chiết có cách thức hoạt động khác nhau, ưu điểm và nhược điểm phù hợp tùy thuộc vào mục đích sử dụng.
Bạn đang xem: 3 Phương pháp tách chiết nucleic acid phổ biến hiện nay
1. Phương pháp tủa phenol-chloroform
Phương pháp này đã được giới thiệu vào năm 1998 bởi Baker và cộng sự. Các thành phần như phenol, guanidin isothiocyanate, và β-mercaptoethanol có vai trò chính trong việc phá vỡ cấu trúc protein của màng tế bào và vỏ capsid của virus. Đồng thời, chúng cũng làm bất hoạt các enzyme phân hủy DNA tồn tại trong hỗn hợp. DNA được giải phóng và di chuyển vào pha nước. Sau đó, chloroform được sử dụng để tách hoàn toàn phenol ra khỏi pha nước, giúp phân tách giữa pha nước và pha hữu cơ trở nên rõ ràng hơn. Cuối cùng, DNA được hòa tan trong dung dịch nước đã qua xử lý để đảm bảo việc làm sạch DNA và giữ DNA ở trạng thái không tan.
Xem thêm : 7 Mẹo Xử Lý Bọ Trĩ Tận Gốc Không Thể Bỏ Qua
Phương pháp này có ưu điểm là giá thành rẻ nên vẫn được sử dụng phổ biến ở nhiều phòng xét nghiệm và viện nghiên cứu. Tuy nhiên, quy trình thực hiện khá phức tạp và tốn nhiều thời gian, đồng thời không phù hợp để tách chiết mẫu có nhiều protein.
2. Phương pháp tách chiết cột silica
Phương pháp tách chiết này đang được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu và xét nghiệm hiện nay. Trong quy trình này, guanidin hydrochloride có trong dung dịch ly giải phá vỡ cấu trúc protein của tế bào và làm bất hoạt các enzyme phân hủy DNA. Sau đó, DNA sẽ được hấp phụ lên cột silica khi dung dịch ly giải chứa nồng độ muối cao và pH thích hợp. Kế tiếp, cột lọc sẽ được rửa bằng dung dịch để làm sạch DNA đã gắn lên màng. Cuối cùng, DNA được dung giải trong dung dịch nồng độ muối thấp để sử dụng cho phản ứng PCR.
Ưu điểm của phương pháp này là tách chiết nhanh và hiệu quả, đồng thời tiết kiệm thời gian và công sức. Ngoài ra, nó cũng phù hợp với nhiều loại mẫu và sử dụng các chất tẩy thân thiện với môi trường và người dùng. Tuy nhiên, giá thành của các kit tách chiết bằng phương pháp này cao hơn so với phương pháp phenol-chloroform.
3. Phương pháp tách chiết tự động
Xem thêm : Dung dịch khử khuẩn không khí: Giải pháp an toàn và hiệu quả cho y tế
Hệ thống tách chiết tự động dựa trên hạt từ tính ra đời để đơn giản hóa và tiết kiệm thời gian và công sức. Trong quy trình này, guanidin isothiocyanate và các chất khác trong dung dịch ly giải phá vỡ cấu trúc protein của tế bào và vỏ capsid của virus. Đồng thời, chúng làm bất hoạt các enzyme phân hủy DNA và cho phép DNA gắn vào silica trên hạt từ. Sau đó, DNA được rửa sạch và khô để loại bỏ chất bẩn và ức chế. Cuối cùng, DNA được dung giải trong dung dịch nồng độ muối thấp để sử dụng cho phản ứng PCR.
Hệ thống tách chiết tự động phù hợp với nhiều loại mẫu, thực hiện được số lượng mẫu lớn và tiết kiệm thời gian và công sức. Các phòng xét nghiệm và viện nghiên cứu đã đầu tư vào hệ thống này do tính ổn định và hiệu suất cao hơn so với thao tác bằng tay. Hiện tại, chúng tôi đang phân phối một số hệ thống tách chiết tự động phù hợp với nhiều mục đích sử dụng khác nhau.
Tóm lại, đây là một số kiến thức cơ bản về kỹ thuật tách chiết nucleic acid mà chúng tôi mong muốn chia sẻ tới các bạn đọc quan tâm. Nếu bạn muốn tìm hiểu thêm thông tin hoặc có nhu cầu được tư vấn hoặc đặt mua các bộ kit tách chiết nucleic acid, hãy liên hệ với chúng tôi.
Nguồn: https://readyq.vn
Danh mục: Sức khỏe
